Karl af Østrig (eller Habsburg) (Gent, 24. februar 1500 – Yuste-klosteret, 21. september 1558) var konge af Spanien under navnet Karl I (1516-1556), den første, der i sin person forenede Kastiliens kroner og Aragon, og den hellige romerske kejser som Karl V (1519-1558).
Søn af Juana I af Castilla, kendt som Juana la Loca, og Felipe el Hermoso, og barnebarn til Maximilian I af Østrig (Habsburg) og María de Borgoña (fra hvem han arvede Holland, de østrigske områder og ret til tronen. ) og de katolske monarker, fra hvem han gennem sin mor arvede kongeriget Kastilien, Napoli, Sicilien, Indien, Aragon og De Kanariske Øer.